1 色譜柱規(guī)格
產(chǎn)品名稱 | 理論塔板數(shù) | 官能團(tuán) | 基 質(zhì) | 分離模式 | 粒徑 (μm) | 尺寸I.D.×L(mm) |
NH2P-50 4D | 5500 以上 | 氨基 | 聚乙烯醇 | 正相分離 | 5 | 4.6×150 |
產(chǎn)品名稱 | 最大耐壓(MPa) | 最大使用流量(mL/min) | 使用溫度 范圍(℃) | 使用PH 范圍 | 出廠時(shí)溶劑 |
NH2P-50 4D | 10.0 | 1.5 | 4~50 | 2~13 | CH3CN/H2O=75/25 |
標(biāo)準(zhǔn)使用流量:0.5~1.0 mL/min;使用頻率高時(shí),建議在通常流量下使用。
2 使用上的注意事項(xiàng)
聚合物氨基柱與硅膠氨基柱相比,在同樣的流動(dòng)相條件下分離性能高,再現(xiàn)性好。適用于寬的PH 范圍(PH2~13)及各種緩沖液。
Ⅰ 操作注意事項(xiàng)
1) 一定要在規(guī)定的壓力、流量、溫度范圍內(nèi)使用。如果瞬間超過最高使用壓力、或最大使用流量,都有可能會(huì)損壞色譜柱。
2) 樣品必須用流動(dòng)相來(lái)配制。對(duì)于流動(dòng)相(如:乙腈/水=75/25)難溶解的樣品,可將樣品在純水中溶解后,再加乙腈調(diào)成與流動(dòng)相相同的組成。
3) 連接色譜柱之前,對(duì)液相流路系統(tǒng)進(jìn)行充分的清洗。清洗方法如下。
A 流動(dòng)相是極性溶劑/水的情況下
清洗液:NH2P 色譜柱測(cè)試用流動(dòng)相
清洗量:100mL
注意點(diǎn):撥動(dòng)切換閥,對(duì)進(jìn)樣系統(tǒng)也要進(jìn)行清洗。
B 流動(dòng)相是緩沖液的情況下
清洗液:①純水 40mL ②50mM 磷酸水溶液
③純水 40mL ④50mM 氫氧化鈉水溶液 100mL
⑤純水 100mL ⑥NH2P 色譜柱測(cè)定用流動(dòng)相 100mL
注意點(diǎn):撥動(dòng)切換閥,對(duì)進(jìn)樣系統(tǒng)也要進(jìn)行清洗。
C 色譜柱流動(dòng)相置換時(shí),置換流量為0.5mL/min 以下。
4)色譜柱的再生
如果液相流路系統(tǒng)中含有污染填料的成分(金屬離子等),會(huì)引起糖類的洗脫異常、分離性能降低。因此3)流路清洗非常重要。如果出現(xiàn)類似的分析異常,可以對(duì)色譜柱進(jìn)行再生,有可能柱性能會(huì)回復(fù)。再生方法如下。
流量:0.5mL/min
清洗液(清洗時(shí)間): ①純水(10min) ②0.1M 高氯酸溶液(2 hr)
③純水(10min) ④0.1M 氫氧化鈉水溶液(2 hr)
⑤純水(20min) ⑥NH2P 色譜柱測(cè)定用流動(dòng)相(1 hr)
Ⅱ 各種流動(dòng)相使用注意事項(xiàng)
1) 糖分析
① 水、乙腈和乙醇的混合液或各單獨(dú)液的任意比率都可使用。因乙醇水溶液的黏度高,使用流量請(qǐng)低于通常流量。
② 上述的溶液中,也可使用乙腈或乙醇能溶的各種緩沖試劑(如氫氧化四丙基銨、醋酸、醋酸鈉)。使用時(shí)請(qǐng)確認(rèn)是否有沉淀的析出。
③ PH 使用范圍2~13
2) 作為離子交換色譜柱使用
① 磷酸鹽、醋酸鹽等各種緩沖液及氯化鈉、氯化鈣、硫酸鈉等可同時(shí)使用。
② PH 使用范圍2~13
3) 使用溫度
4℃~50℃范圍下使用。高溫使用時(shí)注意防止生成氣泡。低溫下由于流動(dòng)相黏度升高,建議在低流量下使用。
4)色譜柱的再生(簡(jiǎn)單再生法)
0.1N 的NaOH 水溶液在低于通常流量下以10~20 倍色譜柱體積流過色譜柱。
堿洗凈后,一定要置換成30~80%的乙腈水溶液后保存。
3 色譜柱性能的測(cè)試方法
按照下面的條件,對(duì)色譜柱進(jìn)行性能測(cè)試(詳情請(qǐng)參考色譜柱附帶的出廠檢查報(bào)告COA)
色譜柱 | 流動(dòng)相 | 流量 | 色譜柱溫度 | 樣品 | 注入量 |
NH2P-50 4D | CH3CN/H2O=75/25 | 1.0mL/min | 室溫約30℃ | 5mg/mL Sucrose | 6μL |